Rozwiąż zagadkę i wygraj $500!
Zasady Metod w diagnostyce laboratoryjnej
Summary rating: 4 stars
43 Recenzja
Wizyty
:
3971
słów:
900
Opublikowano dnia: maja 25, 2007
WYKRYWANIE BIAŁKA W MOCZU PRÓBY JAKOŚCIOWE
1.Próba przez zagotowanie i zakwaszenie.
Zasada metody: próba ta jest najprostszą próbą wykrywania białka. Pod wpływem temperatury białko ulega dęnaturacji tzn. cząsteczki hydrofilowe przekształcają się w białka hydrofobowe, które koagulują w punkcie izoelektrycznym. Aby doszło do tej koagulacji mocz misi mieć odczyn słabo kwaśny. Odczyn ten osiąga się przez dodanie do moczu kilku kropel rozcieńczonego kwasu octowego. Kwas octowy chroni równocześnie przed wytrąceniem się w moczu zasadowym fosforanów lub węglanów.
2. Próba Mac Wiliama(20% kwas sulfosalicylowy)
Zasada metody: W roztworach poniżej punktu izoelektrycznego dysocjują grupy aminowe białka i dają sole z anionami, przy czym połączenia te z niektórymi anionami zwłaszcza kwasów organicznych są nierozpuszczaIne.Kwas sulfosalicylowy wykorzystuje się do odbiałczania roztworów(białko ulega denaturacji).Kwas sulfosalicylowy znalazł zastosowanie w badaniach ze względu na dużą czułość reakcji.
Pozwala wykryć białko o stężeniu 0.015 g/dl (15 mg/dl)
3. Próba Hellera.
Zasada metody: Stężony kwas azotowy jest jednym z odczynników strącających białko. Na granicy faz zetknięcia się moczu z kwasem powstaje żółto podbarwiony pierścień. Próba ta jest mniej czuła niż próba Mac Williama, występuje dopiero przy stężeniu białka 0,033%(33 mg/dl).
4.Próba na wykrywanie białka ortostatycznego.
Zasada metody: Albumozy wytrącają się na zimno kwasem octowym.
Metoda EXTONA
Zasada metody: Białko wytrąca się roztworem kwasem sulfosalicylowym z siarczanem sodowym, intensywność powstałego zmętnienia określa się pomiarem absorbancji mierzonej przy długości fali 445nm.
WYKRYWANIE GLUKOZY W MOCZU PRÓBY JAKOŚCIOWE
1.Próba Fehlinga.
Zasada metody: Po zmieszaniu F I (7%CuSO4) i F II (winian sodowo-potasowy w NaOH) tworzy się związek kompleksowy, który w połączeniu z glukozą prowadzi do redukcji tworzącego się Cu(OH)2 do tlenku miedziawego Cu2O który wypada w postaci pomarańczowego lub czerwono-pomarańczowego osadu w zależności od ilości glukozy.
2.Próba Nylandera
Zasada metody: Azotan bizmutu zawarty w odczynniku Nylandera pod wpływem związków redukcyjnych przechodzi w bizmut metaliczny w postaci czarno-brunatnego osadu.
3.Próba Benedicta.
Zasada metody: Glukoza redukuje siarczan miedziowy, stopień redukcji ujawnia się różnymi barwami umożliwiając w ten sposób pół ilościowe oznaczenia glukozy. Odczynnik Benedicta nie jest reduktorem przez kreatyninę ani przez kwas moczowy.
Metoda Jakościowa.
Zasada metody: Heksokinazy fosforyzują glukozę zużywając cząsteczkę ATP. Powstający glukozo-6-fosforan jest utleniany przez dehydrogenaze z jednoczesną redukcją NAD+. Po powstaniu NADH towarzyszy wzrost absorbancji przy długości fali 340nm który jest proporcjonalny do stężenia glukozy w moczu.
WYKRYWANIE INDYKANTÓW W MOCZU
Próba Obermayera i Jollesa
Zasada metody: Wykrywanie indykanu oparte jest na reakcji rozbicia tego związku na indoksyl i odpowiedni kwas. Powstały indoksyl utlenia się za pomocą FeCl3 (H2O2,KmnO4). Wytworzony barwnik indygo w następnej fazie zostaje wyskstrachowany za pomocą chloroformu, który zabarwia się najczęściej na niebiesko (w prawidłowym moczu jest go 20mg/24h).
WYKRYWANIE ZWIĄZKÓW KETONOWYCH W MOCZU
Próba Legala i próba Langego.
WYKRYWANIE KRWII W MOCZU
Zasada metoy: (próba piramidynowa) Hemoglobina względnie hemaytna posiada zdolność przenoszenia tlenu z nadtlenków na inne związki które ulegają utlenieniu powodują powstanie charakterystycznego zabarwienia (niebiesko-fioletowy). Tlen zostaje przeniesiony na nadtlenek wodoru na niramidon i utlenia go do barwnego związku.
WYKRYWANIE UROBILINOGENU W MOCZU
Zasada metody: Urobilinogen reaguje z odczynnikiem EHRLICHA tworząc charakterystyczne czerwone zabarwienie. W przypadku powstania czerwonego zabarwienia na zimno, mówi się o zmożonej ilości i oznaczamy na (+),(++),(+++),(++++), a jeśli zabarwienie powstaje po ogrzaniu oznacza to prawidłową ilość urobilinogenu i zapisujemy „w normie”.
WYKRYWANIE UROBILINY W MOCZU
Próba Schlesingera
Zasada metody: Polega na powstaniu zielonej fluorescencji soli cynkowej urobiliny i sterkobiliny. Ponieważ blilirubina przeszkadza usuwa się ją przez dodanie CaCl2 i zalkalizowanie amoniakiem. Wytrąca się osad fosforanów wapnia, które absorbują bilirubinę, mocz przesączamy.
WYKRYWANIE BILIRUBINY W MOCZU
1.Próba Rosina.
Zasada metody: Polega na utlenieniu bilirubiny za pomocą r-r jodu na zieloną biliwerdynę.
2.Próba Fouchett’a.
Zasada metody: Polega na utlenieniu bilirubiny na zieloną biliwerdynę za pomocą odczynnika Fouchett’a.
3.Próba Gmelina.
Zasada metody: Bilirubina w zetknięciu z silnie utleniającym kwasem azotowym utlenia się do kilku pochodnych: zielonej biliwerdyny, niebieskiej bilipurpuryny i żółtej choleteliny.
4.Próba Van Den Bergha.
Zasada metody: Bilirubina z dwuazowanym kwasem sulfanilowym tworzy związek kompleksowy azobilirubinę barwiącą się w środowisku słabo kwaśnym obojętnym lub zasadowym na czarno.
WYKRYWANIE KWASÓW ŻÓŁCIOWYCH W MOCZU
Próba Haya.
Zasada metody: Próba ta oparta jest na własnościach obniżania napięcia powierzchniowego moczu przez kwasy żółciowe.
OZNACZANIE KWASOTY MIARECZKOWEJ MOCZU
Według Angielskiego i Kokota.
Zasada metody: Jednym ze sposobów utrzymania równowagi kwasowo-zasadowej w ustroju jest wydalanie przez nerki wartości kwaśnych określonych jako kwasota miareczkowa. Zasada polega na znalezieniu równowagi ilości zasady potrzebnej do przygotowania pH moczu do pH osocza.
OSADY MOCZU
Nabłonki
Płaskie wielokątne ,Z pęcherza moczowego ,Z miedniczek nerkowych ,Z kanalików nerkowych ,Leukocyty, Erytrocyty.
Wałeczki
(wałeczki prawdziwe) Szkliste ,Ziarniste ,Woskowe ,Komórkowe ,Tłuszczowe ,Śpiączkowe .
(wałeczki rzekome) Cylindroidy (pasma śluzy) ,Mineralne ,Bakteryjne ,Jądrowe i Plemniki .
Związki mineralne
(Elementy moczu kwaśnego) Moczany bezpostaciowe ,Kryształy kwasu moczowego ,Szczawian wapnia ,Dwuzasadowy fosforan wapnia ,Siarczan wapnia ,Kryształy cystyn ,Kwas hipurowy ,Tyrozyna ,Leucyna .
(Elementy zasadowe moczu) Fosforany bezpostaciowe ,Fosforan magnezu ,Moczan amonu ,Trójfosforan amonowo-magnezowy ,Węglan wapnia ,Szczawian wapnia .
(Elementy obojętnego moczu) Moczan bezpostaciowy ,Szczawian wapnia ,Dwuzasadowy fosforan wapnia .
(Inne składniki moczu) Krople tłuszczu ,Kryształy cholesterolu ,Kryształy bilirubiny ,Urochrom ,Kryształy polekowe sulfoamidy .
Więcej streszczeń na temat Zasady Metod w diagnostyce laboratoryjnej